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lundi 11 mars 2013

Qu'est-ce qu'une banque de gènes?

Une banque de gènes est le terme pour les collections de l'acide désoxyribonucléique (ADN) des fragments qui ont été clonés au hasard dans le génome d'organismes. Ils sont clonés dans des plasmides qui peuvent se répliquer indépendamment de leurs chromosomes et des phages, qui sont un virus parasite qui se nourrit de bactéries. Lorsque clone que des plasmides est la collection de cellules hôtes et chacune des cellules contient un fragment d'ADN. Banques de gènes de phages sont constitués de ce qu'on appelle des lysats de phages qui sont des restes de cellules détruites avec un fragment d'ADN inséré. Lorsque des banques de gènes contiennent une collection de toute l'information génétique sur un organisme, ils sont considérés comme une banque de gènes de représentation.

En outre, les bibliothèques peuvent utiliser cellulaire d'acide nucléique recombinant (ARN) pour l'accostage matériau, et cette collection de cellules hôtes avec les vecteurs recombinants est connu comme une banque de gènes ARNc. Criblage de banques de gènes trouve des cellules particulières contenant des vecteurs de clonage d'un gène particulier qui est recherchée dans une banque de gènes et utilise ensuite une des nombreuses techniques d'isolement et de leur récolte. Une fois récoltées, les cellules sont considérées cloné. Afin d'avoir une chance raisonnable d'isoler et de cloner un gène particulier, habituellement seulement de représentation de banques de gènes sont utilisés comme chaque gène et chaque fragment d'ADN d'origine d'un génome particulier qui y sont recueillis. Pour atteindre 99% de chances de localiser un gène particulier pour le clonage humain, plus de 600.000 cellules clonées devraient être examinés pour trouver le gène désiré à partir d'une banque de gènes de représentation.

L'ADN est extrait à partir d'un organisme à commencer une bibliothèque de gènes. La bibliothèque est structuré de façon à pouvoir l'ADN et ses milliers de gènes différents. La bibliothèque est une collection de dizaines de milliers de colonies de bactéries, modulées chacune par un fragment d'ADN de l'organisme qui contient un gène d'intérêt particulier. Les bibliothèques contiennent aussi des enzymes de restriction et un plasmide. Les enzymes de restriction sont utilisés pour lire les informations de nucléotides de l'ADN et sont utilisés pour couper l'ADN en fragments, en séparant les uns des autres nucléotides.

Les mêmes enzymes de restriction coupent les plasmides bactériens et des fragments et des plasmides sont combinés dans un tube à essai pour combiner, ce qui rend une nouvelle combinaison. Ces plasmides recombinants sont ensuite retournés à la culture des bactéries en utilisant soit un choc thermique ou l'électroporation. Ces étapes sont exécutées à plusieurs reprises jusqu'à ce qu'une bibliothèque gène entier a été formée pour un organisme particulier génome de tous les fragments de l'extraction d'ADN d'origine.