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jeudi 10 janvier 2013

Qu'est-ce que l'extraction phénol?

L'extraction au phénol est un processus scientifique d'extraction pur l'acide ribonucléique (ARN) et l'acide désoxyribonucléique (ADN) à partir d'un échantillon de cellules spécifiques. Le procédé consiste principalement à séparer ou enlever les protéines de la cellule, en laissant l'ADN et de l'ARN. Partout dans le monde, extraction au phénol est la méthode la plus largement utilisée pour extraire des échantillons purs de l'ADN et de l'ARN.

Le processus d'extraction du phénol commence lorsque le composé chimique phénol est introduit dans la cellule d'échantillon qui se trouve généralement dans un mélange d'eau. Tout comme l'huile, la structure chimique du phénol ne lui permet pas de mélange facilement avec l'eau, donc il va couler vers le bas juste en dessous de l'eau, depuis le phénol est plus dense. Chimistes, puis mélanger les deux phases - l'eau et le phénol - de créer temporairement une émulsion.

Alors que le phénol est à l'intérieur de la couche aqueuse, il va attirer les éléments protéiques de l'échantillon de cellules et de les briser. L'ADN ou l'ARN, dans l'intervalle, restera intacte à l'intérieur de la phase aqueuse. Ensuite, le récipient de la totalité du mélange est mis à l'intérieur d'une machine appelée une centrifugeuse, ce qui contribuera séparer le mélange en deux phases initiales, le phénol et l'eau. Une fois que le mélange est séparé, chimistes extraire l'eau contenant de l'ADN ou de l'ARN, tandis que la phase phénol est éliminé. L'ADN subit une précipitation à l'éthanol à la suite de «dé-sel» et le rendre plus concentré.

Choisir phénol pour l'extraction de l'ADN se fait parce que le composé est une molécule non polaire, tout à la fois de l'ADN et de l'eau sont constitués de molécules polaires. En chimie, la règle générale est les molécules polaires sont les mieux dissous dans les molécules polaires et les molécules non polaires peuvent facilement dissoudre les molécules non polaires. Cela signifie que si phénol dissout la protéine lors de l'extraction du phénol, il ne sera pas dissoudre l'ADN ou de l'ARN, ainsi ils conservent leur structure et peuvent être extraites hors de l'eau. Le phénol est si efficace dans la dissolution de protéines que celle-ci sera définitivement rompu.

Dans une extraction au phénol, l'acidité de l'ensemble du mélange est important de bien extraire l'ADN et l'ARN. Les chimistes recommandent que le phénol doit avoir un pH supérieur à 7, de sorte que la couche d'eau peut recueillir avec succès l'ADN. A un pH de 4,5, ce qui est déjà considéré comme acide, l'ARN peut-être déjà recueillies par la phase aqueuse. Pour changer le phénol de l'acidité ou l'alcalinité, certains produits chimiques sont ajoutés, tels que le composé ou le tris N-éthylmorpholine.