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mercredi 9 janvier 2013

Qu'est-ce que l'extraction d'ARN?

L'acide ribonucléique (ARN) d'extraction est un procédé de laboratoire couramment utilisés dans la recherche en biologie moléculaire. En isolant des brins d'ARN, les chercheurs peuvent étudier les composantes génétiques d'une variété d'organismes, des bactéries aux humains. Bien que l'acide désoxyribonucléique (ADN) soit l'acide nucléique le plus commun associé à la recherche génétique, l'ARN est le lien entre l'ADN et les protéines cellulaires responsables d'une variété de rôles structurels. Extraction de l'ARN permet aux scientifiques d'étudier la voie de l'information génétique pour la production de protéines et la fonction cellulaire.

Des acides nucléiques, sous la forme d'ADN et d'ARN, détenir l'information génétique nécessaire pour des cellules à fonctionner et à reproduire. Acide ribonucléique, ou ARN, est le lien entre l'ADN et les protéines cellulaires. Des types spécifiques d'ARN copient  des sections spécifiques de l'ADN pour aider à la formation de ces protéines. En suivant le chemin entre l'ADN et les protéines cellulaires aide les chercheurs à comprendre la régulation des gènes et la synthèse des protéines dans les cellules individuelles. Processus qui facilitent l'extraction d'ARN et d'assurer la stabilité des échantillons fournir aux chercheurs un moyen de suivre le chemin entre l'ADN et de l'ARN.

Au cours de l'extraction de l'ARN, des échantillons biologiques sont réduits et purifié dans une mesure telle que l'ARN est isolé pour un examen ultérieur. Composants moléculaires, tels que des protéines, de l'ARN et l'ADN, de séparation ou d'isoler à des moments différents, autorisant l'extraction de certains types d'ARN. Différents tissus et types cellulaires requièrent différentes méthodes d'extraction d'ARN. Bien qu'une variété de méthodes existent pour effectuer l'extraction d'ARN, la centrifugation plus courante utilisations de mélanger des échantillons biologiques avec divers composés chimiques, connus collectivement comme dénaturants.

Une méthode commune de l'extraction de l'ARN est extrait au phénol-chloroforme, également connu sous le nom PC ou EIPC. En utilisant cette méthode, des échantillons de tissus sont mélangés avec des parties égales de phénol et chloroforme. Connue sous le nom d'un mélange à deux phases, la solution est centrifugée dans une solution dénaturante. Deux phases résultat, dont la première est la phase aqueuse et la seconde étant la phase organique. C'est au cours de la phase aqueuse que l'extraction d'ARN se produit, avec l'aide de précipitation à l'éthanol.

D'autres méthodes pour extraire l'ARN varient en fonction de la taille de l'échantillon tissulaire, et qu'elle soit totale ou partielle d'ARN est nécessaire. Pour les échantillons de levures, de plantes ou d'animaux, de l'ARN complets, ou le total des ARN eucaryotes, les échantillons sont nécessaires. Bactéries, d'autre part, nécessitent ARN total procaryotes. Chaque type d'ARN nécessite une méthode différente de la préparation des échantillons, l'extraction et le stockage.

Les complications liées à l'extraction d'ARN sont fréquentes et se rapportent généralement à la dégradation de l'ARN après extraction. Ribonucléase enzymes couramment présents dans des échantillons de tissus se dégradent rapidement l'ARN. S'il n'est pas utilisé rapidement, dégradation de l'ARN peut rendre inutile un échantillon. En réponse, de nombreuses méthodes d'extraction d'ARN comprend les étapes de préparation des échantillons pour le stockage, à la fois avant et après l'extraction, à réduire ou à ralentir la dégradation de l'ARN.