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mercredi 20 mars 2013

Qu'est-ce que l'extraction phénol?

L’extraction par le phénol est un procédé d'extraction d'acide scientifique pur ribonucléique (ARN) et l'acide désoxyribonucléique (ADN) à partir d'un échantillon de cellule spécifique. Le procédé consiste principalement à séparer ou enlever les protéines de la cellule, en laissant l'ADN et l'ARN. Partout dans le monde, l'extraction de phénol est le procédé le plus largement utilisé pour l'extraction des échantillons purs de l'ADN et de l'ARN.

Le procédé selon l'une extraction par le phénol commence quand le phénol de composé chimique est introduit dans l'échantillon de cellules qui se trouve généralement dans un mélange d'eau. Tout comme l'huile, la structure chimique des phénols ne lui permet pas de se mélanger facilement avec l'eau, de sorte qu'il sera enfoncer juste en dessous de l'eau, depuis le phénol est plus dense. Les chimistes seraient alors mélanger les deux phases - l'eau et le phénol - à crée temporairement une émulsion.

Bien que le phénol soit à l'intérieur de la couche aqueuse, on va attirer les éléments protéiques de l'échantillon de cellules et les décomposer. L'ADN ou l'ARN, dans l'intervalle, resteront sans interruption à l'intérieur de la phase aqueuse. Ensuite, le récipient de la totalité du mélange est mis à l'intérieur d'une machine appelée une centrifugeuse, ce qui permettra de séparer le mélange en deux phases originales, thephenol et l'eau. Une fois que le mélange est séparé, les chimistes seraient extraire l'eau contenant l'ADN ou de l'ARN, tandis que la phase de phénol est éliminé. L'ADN subit une nouvelle précipitation dans l'éthanol à «de-sel" et le rendre plus concentré.

Le choix de phénol pour l'extraction d'ADN est fait parce que le composé est une molécule non polaire, tandis que tous les deux de l'ADN et de l'eau sont constitués de molécules polaires. En chimie, la règle générale est les molécules polaires sont mieux dissous dans des molécules polaires, et les molécules non polaires peut facilement dissoudre les molécules non-polaires. Cela signifie que, bien que le phénol se dissout la protéine au cours de l'extraction de phénol, il ne se dissout pas l'ADN ou de l'ARN, ainsi qu'ils conservent leur structure et peuvent être extraites hors de l'eau. Le phénol est si efficace dans la dissolution des protéines que ces derniers seront décomposés de façon permanente.

Dans une extraction par le phénol, l'acidité de l'ensemble du mélange est important d'extraire efficacement l'ADN et l'ARN. Les chimistes recommandent que le phénol doive avoir un pH supérieur à 7, de sorte que la couche d'eau peut réussir à recueillir l'ADN. A un pH de 4,5, ce qui est déjà considéré comme acide, l'ARN peut déjà être recueillie par la phase aqueuse. Pour modifier l'acidité ou l'alcalinité du phénol, des produits chimiques sont ajoutés, tels que les tris composé ou la N-éthylmorpholine.